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    D2D Elisa 試劑盒常壓滅菌操作要點

    點擊次數:176次 發布時間:2019-06-16

       D2D Elisa 試劑盒在的實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA。

      D2D Elisa 試劑盒以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
      應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。
      D2D Elisa 試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品的濃度。
      D2D Elisa 試劑盒常壓滅菌操作要點:
      (1)進鍋不擠壓:擺放待滅菌的菌種袋必須分層,每層菌種袋不可擺太擠,要留一定空隙,不能相互擠壓。不適宜將菌種袋臥疊,要分層立放,以保證蒸汽暢流和接種穴完好。為了避免棉塞易潮濕,可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙,但覆蓋物不可太大,否則會影響上下層蒸汽暢流;也可將4個菌種袋的棉塞并攏,棉塞向下一同塞到4個菌種袋的空隙中,這樣塑料袋規格要加長,但防潮效果良好。
      (2)及時滅菌:隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時間越短越好,以免雜菌自繁。大規模生產時,要分鍋滅菌。
      (3)攻頭:指開始滅菌時要大火猛燒。從開始滅菌到溫度達100℃,歷時越短越好,zui多不能超過2小時,以免長時間高溫高濕造成雜菌自繁。當然,要做到這一點還取決于滅菌鍋的保溫保氣性能。
      (4)控中間:指鍋體下部溫度達到100~C后,控制火勢燒穩火,維持8~10小時。此間,溫度不可回落,滅菌操作者要堅守崗位,不能因通宵滅菌、疲勞或其他原因而懈怠,引起溫度回落。另外,常壓滅菌為了避免燒干應注意及時向蒸發鍋內補充水,但補水不能造成鍋內水停止沸騰,可考慮補充沸水或微量連續補水。可見,要想節省燃料,又要做到上述這些,建造一個保溫、保汽性能良好的滅菌鍋十分重要。
      (5)保尾:指滅菌結束前要再一次大火猛燒。目的在于加大蒸汽量,滅菌結束后打開柜門時有大量蒸汽冒出,帶走棉塞濕氣。但此時要將連體滅菌鍋中蒸發鍋內的水排干。在開門時先將門拉開一條縫隙散氣,烘干棉塞,避免冷熱接觸產生冷凝水使棉塞受潮。
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