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    FSH elisa 試劑盒樣本的處理和操作步驟

    點擊次數:127次 發布時間:2019-09-16

       FSH elisa 試劑盒技術原理:

      (1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
      (2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
      (3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
      (4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
      (5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
      (6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
      FSH elisa 試劑盒標本的處理:
      (1)細胞培養上清液
      根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
      (2)腦脊液
      根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
      (3)血漿
      ①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
      ②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質影響檢測,按照說明書指定方法檢測。
      FSH elisa 試劑盒操作步驟:
      1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
      2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
      3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
      4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
      5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
      6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
      7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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